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本发明提供一种人血清糖化白蛋白检测试剂盒,它包括试剂1和试剂2,其中...用葡萄糖试剂盒测定无葡萄糖后,采用HPLC测定糖化白蛋白的含量及占总蛋白的 ...
人血清糖化白蛋白检测试剂盒技术领域
本发明涉及医学检验技术领域,具体涉及一种人血清糖化白蛋白检测试剂盒。
背景技术
糖尿病是由遗传因素、免疫功能紊乱、微生物感染及其毒素、自由基毒素、精神因素等各种致病因子作用于机体导致胰岛功能减退、胰岛素抵抗等而引发的糖、蛋白质、脂肪、水和电解质等一系列代谢紊乱综合征,是危害人类疾病的几大疾病之一。
人体血清中白蛋白占血清蛋白的66%,其余为免疫球蛋白;血清中葡萄糖与血清蛋白的N-末端发生非酶促的糖基化反应,生成糖化血清蛋白,而糖化白蛋白则占糖化血清蛋白的90%以上。另外,由于白蛋白在血清中含量稳定存在,而球蛋白则会由于感染等疾病因素造成波动;故准确测定糖化白蛋白对准确反应糖尿病的的血糖控制情况非常重要。
所以如何能精确地测定出人血清中的糖化白蛋白量成为临床检测糖化白蛋白的关键。目前市场主要采用酶法用于检测人血清中的糖化白蛋白,其反应原理为首先使用蛋白酶将糖化蛋白消化成低分子量的糖化多肽,随后使用果糖氨基酸酶催化糖化多肽发生氧化反应生成多肽(或氨基酸)、葡萄糖醛酮和H2O2,释放的H2O2通过终点反应比色法来测定,其在600nm处的吸收值与糖化白蛋白的浓度成比例。具体反应过程如下:
而目前市场上的酶法糖化白蛋白存在下述缺陷:
(1)不能完全排除球蛋白的干扰:所采用的蛋白酶底物特异性差,对血清中所有蛋白种类都可以进行分解,故无法排除球蛋白的干扰;
(2)试剂盒稳定性差:因为偶联为Trinder反应,而该反应易受到还原性物质的干扰,由于目前大量输入抗坏血酸等还原性物质的缘故,很多病人血清中高的还原物质对反应造成很大的干扰;而去除抗坏血酸所采用的抗坏血酸氧化酶又容易受到蛋白酶的分解;蛋白酶自身也可以发生自分解反应,稳定性差;
(3)试剂盒成本高:为了将糖化白蛋白完全分解为糖化氨基酸,以便参与下步反应,故采用高浓度的蛋白酶,所采用的酶量也很高,故导致试剂...
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