原位雜交技術(In Situ Hybridization | 合法醫療器材資訊網

  原位雜交技術(In Situ Hybridization, ISH)是結合分子生物學、細胞學以及組織化學的一門新興技術。此技術始於1969年，耶魯大學的Gall等人首先將爪蟾核醣體基因探針與其母卵細胞雜交，將該基因進行定位。另外，Buongiorno—Nardelli和Amaldi等人相繼利用同位素標記核酸探針，進行細胞或組織的基因定位，而創造了原位雜交技術[1]。

  直至20世紀80年代末，原有的放射性原位雜交技術慢慢轉型為以螢光染料的探針進行偵測，讓此技術更加安全、穩定及容易操作，而更重要的，現今可以透過不同螢光染料，同時在同一個檢體上做不同偵測[2]。目前此項技術更應用於動植物基因組結構研究、病毒感染分析、染色體精細結構變異分析、產前診斷、腫瘤遺傳學以及基因進化等許多研究領域[3]。

  原位雜交技術的基本原理，以標記的單鏈核酸為探針，按照鹼基互補的原理，與組織、細胞或染色體上的單鏈核酸(DNA或RNA)進行雜交，透過螢光或放射線標記，形成能被偵測的雜交雙鏈核酸[2][3]。因此，原位雜交技術有3個重要的因素，(1)固定的組織、細胞或染色體；(2)標定的單股核甘酸序列(探針)；(3)結合探針的標記物(螢光或放射線)。

以下介紹幾種原位雜交技術[1]

1、基因組原位雜交技術(Genome in situ hybridization，GISH)，GISH是主要是利用物種之間DNA同源性的差異，用另一物種的基因組DNA以適當的濃度，在目標染色體上進行原位雜交。其技術最初應用於動物方面的研究，而在植物上最早應用於鑑別小麥雜種和栽培種的鑒定 [1]。

圖一、基因組原位雜交技術之結果

2、螢光原位雜交技術(Fluorescence in situ hybridization，FISH)，FISH是以螢光染劑取代放射線的原位雜交技術。此技術主要利用螢光標記的單鏈核酸片段為探針...