Overview of ELISA | 合法醫療器材資訊網

ELISA(enzyme-linkedimmunosorbentassay)isaplate-basedassaytechniquedesignedfordetectingandquantifyingsolublesubstancessuchaspeptides, ...

ELISA（酵素結合免疫吸着アッセイ）は、プレートベースアッセイの技術であり、ペプチド、タンパク質、抗体、およびホルモンなどの物質を検出や定量化する用途に向けてデザインされています。また、ELISA技術は、「酵素免疫測定法（EIA）」など別の呼称で言及される場合もあります。ELISAでは、固体表面へ固定化した抗原を、酵素へ結合した抗体とともに混合させる必要があります検出を達成するには、測定可能生成物を産出する基質のインキュベーションにより、結合酵素活性を評価します。検出において最も決定的要素となるのは、高特異的な抗体、そして抗原どうしの相互作用です。

通常ELISAは、96ウェル（または384ウェル）ポリスチレンプレート上で実行され、抗体やタンパク質へ受動的に結合します。試薬のこうした結合や固定化の特性のおかげで、ELISAのデザインと実行は非常に簡単になります。.ELISAで得られた反応物をマイクロプレート表面へ固定化すると、アッセイ中に非結合物質からの結合を分離しやすくなります。非特異的な結合物質を除去するこうした能力は、ELISAが粗調製物中の特定検体の測定用ツールとして有用である所以です。

検出酵素やタグ類は、一次抗体へ直接結合させたり、一次抗体を認識する二次抗体へ導入させることができます。また、一次抗体がビオチン標識されていれば、ストレプトアビジンなどのタンパク質へこの検出酵素やタグ類を結合させることも可能です。代表的な酵素標識として、西洋ワサビペルオキシダーゼ（HRP）およびアルカリホスファターゼ（AP）が利用されています 。他の酵素が利用されることもありますが、基質オプションが限られているため、広く普及するには至っていません。その他酵素としては、β-ガラクトシダーゼ、アセチルコリンエステラーゼおよびカタラーゼなどが挙げられます。HRPコンジュゲートやAPコンジュゲートを用いたELISAを実行する用途に、豊富な...