限制性核酸内切酶 | 合法醫療器材資訊網
限制性核酸内切酶...限制性核酸内切酶是可以识别并附着特定的核苷酸序列,并对每条链中特定部位的两个脱氧核糖核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割的一类酶,简称限制酶。根据 ...
用来识别特定的脱氧核苷酸[1]序列,并对每条链中特定部位的两个脱氧核糖核苷酸[2]之间的磷酸二酯键[3]进行切割的一类酶 [1]。 限制性核酸内切酶 一般是以微生物属名的第一个字母和种名的前两个字母组成,第四个字母表示菌株(品系)。例如,从Bacillus amylolique faciens H中提取的限制性内切酶称为Bam H,在同一品系细菌中得到的识别不同碱基顺序[4]的几种不同特异性的酶,可以编成不同的号,如HindⅡ、HindⅢ[5],HpaI、HpaⅡ,MboI、MboⅡ等。别名:restriction endonuclease简称限制酶
酶反应[6]:限制性内切酶能分裂DNA分子[7]在一限定数目的专一部位上。它能识别外源DNA[8]并将其降解。单位定义:在指明pH与37℃,在0.05mL反应混合物中,1小时消化1μg的λDNA的酶量为1单位。
性状制品不含非专一的核酸水解酶[9](由10单位内切酶与1μg λDNA,保温16小时所得的凝胶电泳[10]图谱的稳定性表示),这类酶主要是从原核生物[11]中分离出来的,迄今已经从近300多种不同的微生物中分离出约4000种限制酶。 限制性核酸内切酶分布极广,几乎在所有细菌的属、种中都发现至少一种限制性内切酶,多者在一属中就有几十种,例如在嗜血杆菌属[12]中(Haemophilus)现已发现的就有22种。有的菌株含酶量极低,很难分离定性;然而在有的菌株中,酶含量极高.如E. coli的pMB4(EcoRI[13]酶)和H. aegyptius(Hal Ⅲ酶)就是高产酶菌株。据报道从10g的H. aegyptius的细胞中,能分离提纯[14]出可消化10gλ噬菌体[15]DNA[16]的酶量。细菌是限制性内切酶,尤其是特异性[17]非常强的I类限制性内切酶的主要来源。 根据酶的功能特性[18]、大小及反应时[19]所需的辅助因子[20],限制性内切酶可分为两大类,即I类酶和Ⅱ酶。最早从大肠杆菌[21]中发现的EcoK、EcoB就属于I类酶。其分子量较大;反...
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