[求救] 斑馬魚成魚臟器RNA萃取 | 合法醫療器材資訊網
請問各位RNA神人們QQ我近來需要萃取斑馬魚成魚胰臟進行Q-PCR的基因表現量定量實驗所以理論上RNA的品質不可以太糟而我們實驗室之前都只有在萃取斑馬魚 ...
請問各位RNA神人們QQ 我近來需要萃取斑馬魚成魚胰臟進行Q-PCR的基因表現量定量實驗 所以理論上RNA的品質不可以太糟 而我們實驗室之前都只有在萃取斑馬魚胚胎的total RNA,而我已經有爬過文, 並且問過估狗大神怎麼抽斑馬魚的胰臟RNA了,可是沒有找到適合的方法 目前我使用的方法是: (取sample) 1.把成魚用低溫使其凍暈/死 2.利用水震盪過的鑷子以及剪刀將成魚從洩殖腔往前往上剪開 3.把魚皮剝掉後去除卵巢/精囊 4.把腸道上覆蓋的肝臟去除 5.把腸系膜剝除(斑馬魚胰臟分布位置) (RNA萃取) 1.把取出的樣品加入600ul Trizol用研磨棒磨碎 2.用24G的針頭來回抽取數次確認樣品非常的碎 3.再加入600ul Trizol 4.加入250ul chloroform 5.用votex的方法震盪到混和液是草莓牛奶的顏色 6.離心13500rpm,30min,4度C 7.抽取上清液到新的1.5cc tube 8.加入上清液一半體積的酸phenol,輕微搖晃混合靜置5min 9.加入和phenol等體積的chloroform混和均勻 10.離心13500rpm,30min,4度C (重複step7-10一次) 11.抽取上清液 12.加入1/2體積的salt(1.2M sodium Chloride, 0.8M Sodium Citrate) 和1/2體積的2-propanol 13.-20度C沉降20分鐘 14.離心13500rpm,20min,4度C 15.75%DEPC-EtOH wash pellet 16.抽風櫃中air dry 17.40ul DEPC-DDW回溶(60度C) (結果) con.(ng/ul) 260/280 pancreas RNA 1861 2.1 4dpf embryo 1369 2.1 RNA膠圖 http://imgur.com/ZjUJMwK[1] 以上謝謝大家 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.130.98.167 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1438586868.A.3BF.html[2]1F→a90648: 為什麼要做8~11的...
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[討論] 抽取組織RNA的步驟 | 合法醫療器材資訊網
我跟我同學是跟不同學姐學抽RNA的技術我們使用的藥劑也都幾乎相同但是現在 ... 太相同不曉得是否會有影響因此上來請教一下大家以下是抽取RNA的步驟1. ... 吸取上清液後測核酸濃度,轉cDNA -- ※ 發信站:批踢踢實業坊(ptt.cc) ... Read More
[求救] 如何提升RNA提取質量 | 合法醫療器材資訊網
大家好,目前提取RNA遇到一個瓶頸,想請版友指點迷津: 收集RNA的步驟是 ... 每次收集下來的RNA我都固定溶於10ul DEPC water,所有樣品固定使用1ml ... 謝謝感激不盡-- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 58.114.139.73 ... Read More
[求救] RNA萃取 | 合法醫療器材資訊網
最後一步萃取時沒換tube,結果我的RNA跟水和酒精就很融洽的混在一起了... 我想問的是有沒有辦法去除酒精而不讓RNA降解掉或是去除水而讓RNA ... 大大幫幫忙嚕~ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◇ From: 123.194.204.47. Read More
[求救] 請教RNA 萃取達人 | 合法醫療器材資訊網
在使用Trizol 方法萃取RNA 後在最後回溶的步驟若用formamide 來回 ... 感謝分享~ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◇ From: 210.60.122.160. Read More
[求救] 斑馬魚成魚臟器RNA萃取 | 合法醫療器材資訊網
請問各位RNA神人們QQ 我近來需要萃取斑馬魚成魚胰臟進行Q-PCR的基因 ... 的品質不可以太糟而我們實驗室之前都只有在萃取斑馬魚胚胎的total RNA, ... 以上謝謝大家-- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.130.98.167 ... Read More
[求救] 抽RNA後的風乾如何做的? | 合法醫療器材資訊網
我又來啦~~ 想請問大家關於抽RNA的問題我是用TRIzol抽total RNA 在最後 ... 都偏低細胞數用的很多RNA量應該不會只有這樣ˊˋ 沉澱後的pellet也很 ... 拜託了<(_ _)> -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◇ From: 220.129.153.236. Read More
[新聞] RNA 萃取試劑盒短缺!CDC:美國錯失追蹤 | 合法醫療器材資訊網
完整標題:RNA 萃取試劑盒短缺! ... 日期2020 年03 月11 日17:30 POLITICO 3 月10 日報導,日益稀缺的RNA(核糖核酸)萃取試劑盒是美國實驗室在對. ... 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 101.11.20.199 (臺灣) ※ 文章網址: ... Read More
[求救] 萃取皮膚組織RNA 時degrade 很嚴重 | 合法醫療器材資訊網
... 問題----請將上列注意事項以ctrl + k 刪除後開始編輯文章---- 試驗欲萃取裸鼠皮膚RNA 進行microarray 實驗結果萃取的RNA 樣品degrade 很嚴重. Read More
[求救] 抽RNA 加75%EtOH離心後無pellet | 合法醫療器材資訊網
... 開始編輯文章---- 小弟用實驗室的protocol抽RNA 基本上是phenol-chforoform法 ... 清洗用的酒精揮發後將pellet用純水回溶→ 測定RNA濃度由於260/230大於2.5 ... 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.114.95.203 ※ 文章網址: ... Read More
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