硫酸铵沉淀法的原理及步骤 | 合法醫療器材資訊網

硫酸铵沉淀法的原理及步骤·1.样品（如腹水）20000′g离心30min，除去细胞碎片；·2.保留上清液并测量体积；·3.边搅拌边慢慢加入等体积的SAS到上清液中， ...

二， 试剂及仪器

1 . 组织培养上清液、血清样品或腹水[6]等 2. 硫酸铵（ NH 4 ） SO 4 3. 饱和硫酸铵溶液（ SAS ） 4. 蒸馏水 5. PBS( 含 0.2g /L 叠氮钠[7] ) 6. 透析袋 7. 超速离心机 8. pH 计 9. 磁力搅拌器

三， 操作步骤

以腹水或组织培养上清液为例来介绍抗体的硫酸铵沉淀。各种不同的免疫球蛋白盐析所需硫酸 铵的饱和度也不完全相同。通常用来分离抗体的硫酸铵饱和度为 33% — 50% 。

（一）配制饱和硫酸铵溶液（ SAS ）

1.将 767g （ NH 4 ） 2 SO 4 边搅拌边慢慢加到 1 升 蒸馏水中。用氨水[8]或硫酸调到硫酸pH7.0 。此即饱和度为 100% 的硫酸铵溶液（ 4.1 mol/L, 25 ° C ）.

2.其它不同饱和度铵溶液的配制 （二）沉淀 1.样品（如腹水） 20 000 ′ g 离心 30 min ，除去细胞碎片； 2.保留上清液并测量体积； 3.边搅拌边慢慢加入等体积的 SAS 到上清液中，终浓度为 1 ： 1 （

4.将溶液放在磁力搅拌器上搅拌 6 小时或搅拌过夜（ ...