IHC染色法 | 合法醫療器材資訊網

2008年9月17日—IHC染色法(撈片起來後放65℃烘箱，烤片30分鐘)~林顯昌建議1.要做時放烘箱5分鐘，65℃直至paraffin溶解，取出玻片使之冷卻至室溫(此時可 ...

IHC 染色法 (撈片起來後放65℃烘箱，烤片30分鐘)~林顯昌建議 1. 要做時放烘箱5分鐘，65℃直至paraffin 溶解，取出玻片使之冷卻至室溫(此時可開始準備電鍋(電鍋要裝水)預熱，將citrate buffer pH6.0裝入黑盒中，將黑盒放入電鍋中一併預熱約10分鐘) 2. 脫臘:xylene 10分鐘2次 3. 復水:100%EtoH 2次各2分鐘→95% EtoH 2分鐘→80% EtoH 2分鐘→75%EtoH 2分鐘 4. 將玻片放在1X PBS裡，保持sample濕潤(1X PBS:800C.C MQ水+200C.C 5X PBS=1000 C.C, 每次都泡1000 C.C) 5. 用p.p pen 把神經的周邊圈畫起來，畫好之後要把玻片放回1X PBS水裡 6. 滴3% peroxidase在玻片上約10分鐘。 7. 將玻片放入電鍋中的黑盒中(黑盒內裝有citrate buffer pH6.0 )，在電鍋中隔水加熱30分鐘。 8. 冷卻至室溫(隔水冷卻) 9. 1X PBS水洗 10. Blocking solution(藍)10分鐘以及1X PBS簡單的水洗 11. 1Ab:20μl的α-SMA(smooth muscle actin)+1000μl的1X PBS裝在tube裡，染1小時，然後1X PBS完整的水洗 12. 2Ab(黃)20分鐘，然後1X PBS完整的水洗。 13. HRP(紅)10分鐘，然後1X PBS完整的水洗。 (此時的10分鐘裡可開始製備DAB溶液:1C.C的1X PBS裝入tube內，再拿DAB Kit 共3瓶，每一瓶各1滴滴入tube內。) 14. DAB染色5分鐘，然後1X PBS完整的水洗。 15. 染Hematoxylin(1:1) 30秒，然後用MQ水洗 16. 自然水不要直接沖檢體，水洗5分鐘。 17. 脫水:75% EtoH 1分鐘→85% EtoH 1分鐘→95% EtoH 1分鐘→100% EtoH ︱ 1分鐘→100% EtoH Ⅱ 1分鐘→xylene ︱ 10分鐘→xylene Ⅱ 10分鐘 (因為100% EtoH ︱及xylene ︱一開始復水都先用故較髒所以脫水的步驟中...

技術分享 | 合法醫療器材資訊網

2019年5月24日 — 進行組織免疫染色(IHC)前的切片步驟其實也是相當重要組織包埋前處理 ... 烤片時間一般會至少隔天才會把玻片收起來，不然也會容易掉片，至. Read More

『拓生科技 | 合法醫療器材資訊網

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免疫組織化學染色(Immunohistochemistry, IHC)染色問題→客戶對於結果的常見 ... 因為做石蠟切片時要高溫烤片，可能會破壞組織的抗原性，如果組織的抗原性較 ... Read More

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