IHC抗原修复 | 合法醫療器材資訊網
酶法中采用蛋白酶K、胰蛋白酶、胃蛋白酶等蛋白酶。热诱导抗原修复法采用热源(来自微波炉、高压锅、蒸锅、水浴锅或高压灭菌锅)和选定的缓冲液 ...
样本固定过程可导致蛋白质发生交联,从而掩盖抗原并限制抗原抗体的结合。抗原修复使抗体能够接触组织内的靶蛋白。被掩盖的抗原表位可以使用酶/蛋白水解抗原修复 (proteolytic antigen retrieval, PIER) 或热诱导抗原修复方法 (heat-induced antigen retrieval method, HIER) 进行恢复。酶法中采用蛋白酶 K、胰蛋白酶、胃蛋白酶等蛋白酶。热诱导抗原修复法采用热源(来自微波炉、高压锅、蒸锅、水浴锅或高压灭菌锅)和选定的缓冲液。最佳的抗原修复技术取决于抗原、组织、固定方法和/或一抗。有些抗原需要加热和酶解相结合才能修复。
为了确定适用于任何特定抗原的最佳修复方法,我们建议测试两种热诱导抗原修复法(例如用 pH 值为 6 的柠檬酸盐缓冲液和 pH 值为 9 的 Tris-EDTA 缓冲液)以及一种或两种酶抗原修复法(例如用蛋白酶 K 和/或胰蛋白酶)。对于固定程度较轻的冷冻切片,可能不需要进行抗原修复。
HIER
PIER
优势
表位修复更温和且可确定参数更多
可用于修复难以修复的表位
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