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ELISA|原理介紹酵素結合免疫吸附分析法,Enzyme-linkedimmunosorbentassay(ELISA)為實驗室中常用的一種分子生物檢測技術,其原理利用抗體與抗原專一 ...
ELISA | 原理介紹
酵素結合免疫吸附分析法,Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) 為實驗室中常用的一種分子生物檢測技術,其原理利用抗體與抗原專一性結合的特性,配合呈色劑反應,利用呈色深淺來定量樣品中特定目標蛋白質的含量。ELISA Kit的優勢在於,只需要少量樣品(100 ul)即可進行檢測、敏感性高並且可以同時檢測多種抗體。
依照樣品及抗原抗體鍵結機制,ELISA主要可以分為三種類型: (1)間接法(indirect) (2) 三明治法(sandwich)(3) 競爭法(competitive)
間接法(indirect)
間接法為檢測抗體常用的方法,原理將酵素標記在二抗上,檢測與盤上抗體結合的抗體。
將抗原固著於塑膠孔盤上,洗去未結合抗原及雜質 加入檢體,使檢體中抗體與固著抗原結合,洗去多餘檢體 加入標記酵素之二次抗體,使二次抗體與盤中待測檢體結合,洗去未結合二次抗體 加入酵素受質顯色,藉由吸光值計算待測抗體含量
三明治法(sandwich)
三明治法為檢測大分子抗原常用的方法,原理利用兩種抗體對檢體中抗原進行兩次專一性辨認。
將抗體固著於塑膠孔盤上,洗去未結合抗體及雜質 ...
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