免疫细胞化学(ICC)和免疫荧光(IF)实验方案及操作步骤 | 合法醫療器材資訊網
查看免疫细胞化学(ICC)和免疫荧光(IF)的实验方案,具体操作流程,同时包括对抗原修复和多色染色步骤的介绍和指导。
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一般流程
1. 用聚乙烯亚胺或多聚赖氨酸涂覆盖玻片,在室温下放置 1 小时。
2. 用无菌水充分漂洗盖玻片 3 次,每次 1 小时。
3. 充分干燥盖玻片,在紫外光下灭菌至少 4 小时。
4. 使细胞在玻璃盖玻片上生长,或制备 Cytospin 或涂片制备物。
5. 用磷酸盐缓冲液 (PBS) 简单漂洗。
推荐使用 1 × PBS 0.1% Tween 20 作为洗涤缓冲液。
固定
可使用以下两种方法中的一种固定细胞:
1. 室温下,在 100% 甲醇(-20 ℃ 冷冻)中孵育细胞 5 分钟。
2. 室温下,在 4% 多聚甲醛(溶于 PBS 中,pH 7.4)中孵育细胞 10 分钟。
用冰 PBS 洗涤细胞 3 次。
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