免疫组织化学(IHC) 染色原理 | 合法醫療器材資訊網
了解如何使用用于免疫组织化学(IHC)实验的抗体成功染色组织。请参阅成功染色的IHC检测示例。
免疫染色使用抗体检测细胞或组织中的抗原。免疫组织化学 (IHC) 中免疫染色的主要好处在于在保持空间环境和组织架构,同时在组织样本中查看所需靶标。
染色类型免疫染色可以直接或间接执行。将我们经应用验证的抗体与一些荧光基团接合以实现直接标记。如想浏览我们提供的直接接合物,请点击这里[1]。
通常,基于抗原表达水平和可接近性,直接接合物不足以可视化关注靶标。在这些情况下,使用二抗间接标记。CST 的首选方法是使用专门针对兔或小鼠 IgG 的高敏感性一步式基于聚合物的检测试剂。
IHC 染色示例在 CST 进行的 IHC 染色的一些示例如下所示。为了有把握评估所需抗原的特定检测,下面使用的每种抗体都经历了我们严格的验证过程。
组织制备影响组织的收集、保存和固定方法根据样品或关注靶标而变化组织的收集和固定直接影响样品完整性和您的实验结果。
福尔马林等交联固定剂常用于制备 IHC(免疫组织化学)样品,因为它们会保留组织的结构完整性,有助于维持组织架构。另一种选择是冻存(冻结)您的样本,如果您试图检测磷酸化靶标,这可能是更好的选择。
抗原(表位)修复用于保持组织样品结构完整性的固定剂也存在缺陷,它们可能会隐藏您的抗体旨在识别的表位。
有几种方法可用来显示在固定过程中被隐藏的表位。这些方法包括依赖于蛋白酶 K 等酶的蛋白水解诱导抗原修复法,或者利用热来解开交联键和分解蛋白的热诱导表位修复法 (HIER)。其中任意一种方法都能显示表位,使它更容易结合一抗,更顺利地进行 IHC(免疫组织化学)染色。
在 CST,我们最常见的抗原修复方法是 HIER。我们的科学家对多种抗原修复方法进行了检测,以确定各抗体在 IHC 中的最佳使用条件。来自 CST 的推荐实验步骤可在任何 IHC 验证抗体[2]的数据表中获得。
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