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2017年8月3日—Real-timePCR又稱Quantitativerealtimepolymerasechainreaction(簡稱RT-​PCR或qPCR)，其概念為在DNA擴增反應中，加入特定螢光染劑， ...

聚合酶連鎖反應(PCR)幾乎是分子生物學中最普遍的技術，PCR主要是三個循環步驟，包括了DNA變性、黏合以及延長，擴增特定序列的DNA片段。接著陸續發展出許多以PCR為基礎，廣泛用於人類的疾病及其他動植物病蟲害等的檢測儀器，其中較常見的有：即時聚合酶連鎖反應(Real-time PCR)、聚合酶連鎖反應-限制性片段長度多態性(PCR-RFLP)、聚合酶連鎖反應(Nested PCR)及多重聚合酶連鎖反應(Multiplex PCR)等。而其中又以Real-time PCR被使用最多，除了縮短反應時間外，隨著技術的更新，更能達到高效率、準確及靈敏度等優點[1]。

    Real-time PCR又稱Quantitative real time polymerase chain reaction (簡稱RT-PCR或qPCR)，其概念為在DNA擴增反應中，加入特定螢光染劑，推算聚合酶連鎖反應(PCR)後的產物總量[2]。

    依其標定螢光物又分成非專一性化學標定(SYBR Green )與專一性化學標定(TaqMan probe)[3]。

第一種為非專一性化學標定(SYBR Green I )：

    SYBR Green I 螢光染劑會與雙股DNA的minor groove結合，崁入DNA中，因此PCR的過程中，在每個循環結束時偵測螢光強弱，就能推算出有多少PCR的產物，但因為是非專一性的結合，所以SYBR Green I除了結合到目標產物上，同時也會結合到其他的DNA中，因此這可說是SYBR Green I 的缺點之一[3]。

圖一、SYBR Green I偵測系統

第二種為TaqMan probe (hydrolysis probe)

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