革蘭氏染色法 | 合法醫療器材資訊網

1原理2實驗器材與藥品3步驟4注意事項此種染色法由丹麥微生物學家Hans...媒染劑：乃革蘭氏碘液，可與初染劑結合而形成不溶性複合物。...取純系化的單離細菌接種(E.coli)至LB培養液中，經18小時增殖後。3.取菌液均勻分散於載玻片上，可快速在酒精燈上加熱一下。...宜使用未超過24小時之新鮮培養，置備抹片。因菌 ...

此種染色法由丹麥微生物學家Hans Christian Gram 於西元1884 年所創， 是最常用的細菌鑑別染色法。步驟如下：

1.初染劑：初染劑乃結晶紫，使細菌染成紫藍色。

2.媒染劑：乃革蘭氏碘液，可與初染劑結合而形成不溶性複合物。所形成之結晶 紫-碘（CV-I）複合體藉以加強染料顏色，此時所有細菌均成紫黑色。

3.脫色劑（Decoloring agent）：乃95%乙醇，此試劑具有脂溶性（lipid solvent） 與蛋白質脫水劑之雙重功能。其作用依微生物細胞壁所含脂肪濃度而定。[[格蘭氏 陽性菌]]之脂質含量低且細胞壁具有厚層之汰聚醣，乃保留CV-I 複合體之主要因 素，因少量之脂質經乙醇作用，立刻溶解，形成細胞壁之細孔，但此細孔隨即因 乙醇之脫水作用而封閉，以致緊密結合之初染劑不易移去，終於保留紫色。[[革蘭 氏陰性菌]]細胞壁中之外層含高量之脂質，易為乙醇溶解，形成大孔。即使引起細 胞壁蛋白之脫水也不易封閉該孔，因此有利於未結合CV-I 複合體之釋出，致使 菌體成無色。

4.複染劑：最後試劑為番紅，凡經上述脫色之細菌，被此染料染成紅色。因僅革 蘭氏陰性菌發生脫色，故於此步驟能吸收複染劑。革蘭氏陽性菌則保留初染時之 紫色。

革蘭氏陽性菌與革蘭氏陰性菌的比較

__性 質_______________革蘭氏陽性菌___________革蘭氏陰性菌_____________

1.染色結果_____________仍維持紫色____________由紫色變為紅色____________

2.細胞壁組成________脂質含量較少(1-4%)__...