多重聚合酶鏈式反應 | 合法醫療器材資訊網
該過程使用多個引物和熱循環儀中的溫度介導的DNA聚合酶擴增樣品中的DNA。...多個序列,可以從一次測試運行中獲得其他信息,否則將需要數倍的試劑和更多 ...
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多重聚合酶鏈式反應(英語:Multiplex Polymerase Chain Reaction, Multiplex PCR)是指利用聚合酶鏈式反應同時擴增數個不同的DNA序列(像在同一個反應中進行許多單獨的聚合酶鏈式反應)。該過程使用多個引子和溫度敏感的DNA聚合酶在循環熱儀裡複製樣品中的DNA。其中使用的的所有引子必須特別設計以符合相同的黏合溫度。
1988年,多重PCR首次被用來檢測肌肉萎縮症基因缺陷的方法[1]。它也被用來檢測類固醇硫酸酯酶
基因[2]。 2008年,多重PCR技術開始被用來分析微衛星和SNP[3]。2020年,美國疾管局使用了反轉錄多重PCR技術來針對 SARS-CoV-2 病毒中的多個基因標的進行檢測,此技術增加了單一測試的目標數量和樣品通量大小。[4]
多重PCR的一組反應物中包含多個引子組,能夠針對不同DNA序列放大出大小不同的擴增子,進而可以從單次測試中獲得原本需要更多時間和耗材的反應結果。每個引子組的黏合溫度必須特別設計,以在同個反應中正確放大目標,另外擴增子的大小(即其產物鹼基長度)應有足夠的差異,以便在凝膠電泳的結果中分辨為不同的條帶。如果擴增子大小太相近,則可選擇使用帶有不同顏色的螢光標定的引子來區分不同的擴增子。市面上已有用於多重PCR的試劑組,並被許多法醫實驗室用來放大已被分解的DNA樣品。
多重PCR的一些應用包括:
病原鑑定:例如下呼吸道感染的病人往往在微生物培養前常已使用了抗生素,有時不容易培養出致病菌。2006年時Stralin、Korsgaard、Olcen等人以多重PCR檢測支氣管肺泡沖洗液(bronchoalveolar lavage, BAL)中的S. pneumoniae(lytA, 229 bp)、M. pneumoniae(Pl, 483 bp)、C. pneumoniae(ompA, 368 ...聚合酶連鎖反應 | 合法醫療器材資訊網
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