凝膠電泳 | 合法醫療器材資訊網
凝胶电泳(英语:Gelelectrophoresis)或称胶体电泳,是一种用于大分子(如DNA、RNA、蛋白质)...通常SDS鍵結的量跟蛋白質的大小有關係,所以鍵結後變質的蛋白質帶有負電荷, ...
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一部洋菜凝膠電泳,瓊脂糖凝膠(洋菜膠)置於充滿緩衝液的盒中,電源由後方施加電流。負極在遠端(黑線),因此 DNA 向帶正電的陽極(紅線)遷移。凝膠電泳(英語:Gel electrophoresis)或稱膠體電泳,是一種用於大分子(如DNA、RNA、蛋白質)以及其碎片的分離、分析技術。該技術被科學工作者用於分離具有不同物理性質(大小、電荷、等電點)的分子。凝膠電泳通常用於分析用途,但也可以作為預處理技術,在進行質譜、聚合酶連鎖反應、克隆、DNA定序或者免疫墨點等檢測之前,進行分子的純化。
凝膠電泳在用於分離核酸分子時,帶有負電荷的核酸分子在外加電場的作用下穿過凝膠組成的網格。由於較小的分子更容易通過網孔,較小的分子凝膠基質中穿行地更快,並且可以移動得更遠。這與分子篩的現象類似。[1]
在分離蛋白質分子時,蛋白質分子往往由於太大而不能穿過凝膠中的網孔,因此蛋白質的分離是依靠蛋白質分子上帶的電荷來進行的。
除了分離核酸和蛋白質等分子,凝膠電泳還可以用於分離奈米微粒。
之所以選用凝膠而不是液體作為電泳的介質,有以下因素的考量:首先,外加電場可以引起液體的熱對流,在膠體中這種對流會被抑制;其次,有的凝膠可以起到一種分子篩的作用;凝膠還可以延緩分子穿越的速度,並且能在電泳後保持分離結果,為後續的染色提供機會。[2]
物理原理[編輯]凝膠電泳是由「凝膠」和「電泳」兩個術語複合而成。
凝膠是固態的、多孔隙的交聯聚合物,是整個實驗進行的基質。大多數情況下,凝膠是由交聯的多聚物組成的。多聚物的組成和孔隙都會根據目標分子的性質來設計。
在分離蛋白質...
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