流式細胞儀的發展及臨床應用 | 合法醫療器材資訊網
FCM採用流式細胞儀對細胞懸液進行快速分析,通過對流動液體中排列成單列的細胞進行逐個檢測,得到該細胞的光散射和螢光指標,分析出其體積、內部結構、DNA、RNA、蛋白質、 ...
流式細胞儀的發展和臨床應用
流式細胞儀(FCM)是70年代初發展起來的一項高新技術,80年代開始從基礎研究發展到臨床醫學研究及疾病的診斷和治療監測。
FCM採用流式細胞儀對細胞懸液進行快速分析,通過對流動液體中排列成單列的細胞進行逐個檢測,得到該細胞的光散射和螢光指標,分析出其體積、內部結構、DNA、RNA、蛋白質、抗原等物理及化學特徵。FCM綜合了光學、電子學、流體力學、細胞化學、生物學、免疫學以及鐳射和電腦等多門學科和技術,具有檢測速度快、測量指標多、採集資料量大、分析全面、方法靈活等特點,還有對所需細胞進行分選等特殊功能。隨著該儀器性能的不斷完善,操作簡單的各新型流式細胞儀相繼問世。新試劑的不斷發現使試驗費用日益降低,FCM也從研究室逐步進入臨床實驗室,成為常規實驗診斷的重要手段,不僅為臨床提供了重要的診斷依據,也使檢驗科室的診斷水準、實驗技術提高到一個新的高度。
一、流式細胞儀工作原理
生產流式細胞儀的主要廠家是美國的BD公司和貝克曼庫爾特(BeckmanCoulter)兩家公司,它們生產出一系列科研型和臨床型的流式細胞儀,並研製生產了FCM所用的各種單克隆抗體和螢光試劑。科研型流式細胞儀(如FACStar, FACSort, EPICS-Elite等)功能齊全,分析靈活,但操作比較繁瑣,必須由經過正規培訓的專業技術人員進行操作。臨床型的儀器(FACScan, Profile等)易於操作,穩定性好,分析速度快,適合在臨床實驗室中應用。
流式細胞儀的工作原理是將待測細胞經特異性螢光染料染色後放入樣品管中,在氣體的壓力下進入充滿鞘液的流動室。在鞘液的約束下細胞排成單列由流動室的噴嘴噴出,形成細胞柱,後者與入射的雷射光束垂直相交,液柱中的細胞被鐳射激發產生螢光。儀器中一系列光學系統(透鏡、光闌、濾片和檢測器等)收集螢光、光散射、光吸收或細胞電阻抗等信號,電腦系統進行收集、儲存、顯示並分析被測定的各種信號,對各種指標做出統計分析。
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