布拉德福蛋白質定量法 | 合法醫療器材資訊網

布拉德福蛋白質定量法（Bradford protein assay），亦稱作「考馬斯亮藍法」、「考馬斯藍染色法」（coomassie blue staining），為一種利用光譜學技術分析溶液中蛋白質濃度的技術。本定量法會受待測胺基酸序列影響，此方法為Marion M. Bradford醫生所開發。

布拉德福蛋白質定量法為一種利用比色法測定蛋白質濃度的化驗法。考馬斯亮藍G-250在酸性環境下，會從紅色型態轉為藍色型態，並與蛋白質緊密結合。在形成這個複合物的過程中會經歷兩種反應：紅色態的考馬斯亮藍會先將其自由電子丟給蛋白質的可電離區，造成蛋白質構型改變，並暴露其疏水性區段。於是蛋白質的三級結構會以凡得瓦力與染劑結合。此外，染劑中的負電區會與蛋白質中的正電區相互結合，與蛋白質結合的考馬斯亮藍會因此穩定其藍色構型，造成溶液顏色改變，此時即可利用光譜儀來測量此變化。

與蛋白結合之後的染料，在一段時間（2 分鐘到 1 小時）之內，其吸收光譜圖在 595 nm 處有一個最大吸收峰。[1] 染料在與蛋白結合前，以陽離子形態存在，顯紅色或者綠色；與蛋白結合之後，染料分子的陰離子形態被穩定，顯藍色。染料的吸收光譜在 595 nm 處的吸收峰的增加，正比於結合了蛋白質的染料分子數目，故也正比於樣品中蛋白質的數目（濃度）。

布拉德福蛋白質定量法與其它測量蛋白的方法不同，不容易受到蛋白質中其它化學成分的影響。

此蛋白質分...