Cell culture | 合法醫療器材資訊網
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Cellculture|細胞培養每個實驗室都會進行細胞培養,看起來細胞培養非常簡單,但是實際上卻有許多注意事項。以前研究所時,老師曾經告訴我們,要把細胞當 ...
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Cell culture | 細胞培養
每個實驗室都會進行細胞培養,看起來細胞培養非常簡單,但是實際上卻有許多注意事項。以前研究所時,老師曾經告訴我們,要把細胞當作「男/女朋友」,要了解他/她的需求、要每天噓寒問暖和細心呵護。也許聽起來很誇張,但是對於新進實驗室的菜鳥們,細胞培養的確是一大難題。
了解細胞
開始進行實驗前,必須先了解細胞的種類和培養條件,才能夠先對目標細胞有基本的認識,以及準備細胞需要的環境。
開始實驗前,必須先要了解細胞的身分,包含來源 (人類或老鼠)、組織來源 (肝臟或肺臟)、細胞型態 (圓球、紡錘或完全貼平) 等等。尤其是細胞的型態,用來確認細胞培養時,細胞是否生長良好。
確認好細胞的身分和培養液後,接下來要選擇細胞住的房子——細胞培養皿。實驗室看到的細胞培養皿並不是簡單的無菌塑膠而已,貼附的過程為,細胞首先分泌細胞外基質,這些蛋白質黏附在培養皿的表面,然後細胞才透過細胞膜和細胞外基質的作用黏附到培養皿底部。因此,除了細胞本身的特性之外,也和培養皿表面結構有關。以前最早的細胞培養皿材質為玻璃,但是因為不容易清潔乾淨,以及細胞貼附效果不好,通常需要表面塗層處理,因此後來改用拋棄式的塑膠。使用的塑膠材質為 polystyrene,為有苯環的長碳鏈,優點在於其光學透明性、容易塑模以及可以使用輻射殺菌。缺點卻是它非常疏水,因此會經過尖端放電或是氣體電漿處理,產生的高能量氧原子作用在 polystyrene 上,產生大量的羥基和羰基,而增加親水性。後來更加上合成的 polymer poly-lysine,提高生物相容性,增加細胞貼附和生長。市面上的細胞培養皿沒有太大差別,都可以購買使用,只不過有不同大小的培養皿,依實驗需求購買,切記不要把10 cm dish 和 petri dish 、96 well plate 和 ELISA plate 搞混。有些實驗者會自己再黏附上 collagen Type I, fibronect...
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