瑞氏染色 | 合法醫療器材資訊網
瑞氏染色是最常用而又最简单的染色方法。瑞氏试剂中之酸性伊红和碱性美蓝混合经化学作用后,变成中性之伊红化美蓝,久置后,经氧化而含有天青。此三种染料 ...
瑞氏染料[1]是由碱性染料[2]美蓝( Methvlem blue )和酸性染料黄色伊红( Eostm Y )合称伊红美蓝[3] 染料即瑞氏 (美蓝-伊红Y)染料。伊红钠盐的有色部分为阴离子[4],无色部分为阳离子[5],其有色部分为酸性,故称伊红为酸性染料[6]。美蓝通常为氯盐是碱性的,美蓝的中间产物[7]结晶为三氯化镁[8]复盐[9],其有色部分为阳离子,无色部分为阴离子,恰与伊红钠盐相反。 用甲醇[10]作瑞氏染料溶剂,即成瑞氏染液[11]。甲醇是瑞氏染料良好溶剂,有两种作用: ( 1 )甲醇使瑞氏染料[12]中美蓝( M )与伊红( E )在溶液中离解[13],可使细胞成分选择性吸附其中的有色物质而着色。 在配制的瑞氏染液中美蓝[14]如放置过久即可氧化而含有天青,美蓝天青与伊红化合物能使核染成紫红色,但不能使胞浆[15]染为蓝色,多余 美蓝就可以 使胞浆染成蓝色,染色主要是化学作用,是离子彼此结合的反应。 ( 2 )甲醇具有强大的脱水力,可将细胞固定在一定形态及增加细胞结构[16]的表面积[17],提高细胞对染料吸收作用[18],同时由于甲醇吸附染色液中的水,使染色液升温,加速染色反应[19]。瑞氏染液配制:
瑞氏染料[20] 830mg 或 1g甲醇( AR ) 500ml 或 600ml
先称干燥瑞氏染料(事先放入温箱干燥过夜)放置乳钵[21]内, 用乳棒轻轻敲染料成粉末状,再研磨至细粉末状(听不到研芝麻声)。加少许甘油[22]或甲醇溶解研磨,使染料在乳缸内显“一面镜”光泽而无染料粉粒沉着后,再加较多量甲醇研磨呈一面镜光亮。静置[23]片刻,将上层液体倒入一清洁储存瓶内(最好用甲醇空瓶),再加甲醇研磨,重复数次,直至乳钵内染料及甲醇用完为止。染料完全转移至储存瓶后,摇匀,密封瓶口,室温下避光保存,储存愈久,则染料溶解、分解就越好,一般储存 3 个月以上为佳。 1) 缓冲液[24]作用:染色对氢离子浓度[25]是十分敏感的,据观察 pH 值的改变,可使蛋白...「wright stain步驟」+1 東耀快速血球染色液 | 合法醫療器材資訊網
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