不需忽熱忽冷的LAMP核酸增幅技術@ 有勁的基因資訊:: 痞客邦 | 合法醫療器材資訊網
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2020年10月14日—日本學者Notomi等人在2000年發表了恆溫環狀擴增法(Loop-MediatedIsothermalAmplification;LAMP)這個核酸增幅技術1,為核酸檢測提供了新 ...
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作者:許柏洋/有勁基因
新冠肺炎疫情延燒,全球確診人數持續攀升;部分國家在短暫解禁後又出現確診高峰的情形。良好的篩檢機制能及早檢出病毒帶原者、加以隔離並防止疫情擴散;特別是在疫苗及治療藥物尚未完備的情況下,建立迅速且準確的篩檢方式,相形之下更是重要。現今新冠病毒的篩檢方式主要有三類:核酸檢測、抗體檢測、及抗原檢測;其中核酸檢測因為準確度較高及偽陰性情況較低等優點而廣為各國採用。
目前新冠肺炎病毒的主流核酸檢測方式是利用聚合酶連鎖反應(Polymerase Chain Reaction; PCR)技術將檢體中的核酸放大以檢測其中是否帶有入侵的新冠病毒RNA。不過,傳統PCR技術操作過程繁複且過程中需要反覆升降溫度以裂解及黏合DNA產物,所以儀器方面需要仰賴精準的溫度循環系統;假如循環控溫儀器缺乏或操作人員不足,就很難採行此法。此外,傳統PCR核酸檢測時程約需4小時,一旦面對大量檢體,短時間內也很難取得結果。
日本學者Notomi 等人在2000年發表了恆溫環狀擴增法(Loop-Mediated Isothermal Amplification; LAMP)這個核酸增幅技術1,為核酸檢測提供了新的技術選擇。有別於傳統PCR技術,LAMP核酸增幅技術的操作簡單、作用時間短,且整個反應過程可在60-65℃的恆溫環境下完成,不需要溫度控制系統,因此很適合用在現場或床邊檢測上。LAMP核酸增幅過程中的DNA裂解需仰賴像Bst polymerase這些具有高度DNA鏈置換活性的聚合酶去鏟開模版DNA的雙股構造。這個技術還需要內、外2組引子對(Inner Primers & Outer Primers)去標定6個特定區域的目標核酸序列⼀F1, F2c,F3c,B1,B2c,及B3c (c代表該區域的互補序列。如F1c 為F1區域的互補序列)。內、外引子對在增幅過程中是負責啟動DNA合成、並引發後續自發的一連串增幅動作。LAMP反應若...
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