HPLC原理和基礎知識詳解！讓你第一次接觸HPLC就上手 ... | 合法醫療器材資訊網

HPLC（高效能液相層析法）是實驗室中常常運用到的分析混合物質的方法，...可能會有點難懂的話，想像一下，水與油（如正己烷）兩種溶劑進行液-液分離操作​。

HPLC是高效能液相層析法（High Performance Liquid Chromatography）的簡稱。它是定性和定量分析中最為常用的分析方法之一。

高效能液相層析法[1]可以對含有多種溶質成分的樣本進行快速且同步的定性和定量分析。高精密度的儀器使分析值具有很高的再現度。此外，注入HPLC的樣本量可以從幾微升（μL）的量級開始測量。HPLC系統的配置以及參數可以按照分析者的目的進行選擇，因此適用於很多不同的樣本。正因為這些特點，奠定了它的科技地位，支撐著全世界所有科學領域和產業基礎。

本文推薦給HPLC的新手 & 老手

在講解HPLC之前，我們先簡單回顧一下層析法。

層析法是由俄羅斯植物學家米哈爾・茨威特（Mikhail Tsvett）於1903年創立的一種物理分離物質的技術。基於兩相之間的分佈，層析法可將分離對象（分析種）有效率地分離。「兩相之間」聽起來可能會有點難懂的話，想像一下，水與油（如正己烷）兩種溶劑進行液-液分離操作。由於這兩種溶劑互不相溶，因此即使你試圖將它們混合，它們也會很快分離成兩相，亦即水相與油相。如果你加入另一種成分作為溶質，溶質將以何種相位存在？

例如，當加入糖這種易溶於水的溶質時，由於糖幾乎不溶於油相，所以更多存在水相之中。相反，當加入易溶於正己烷，如沙拉油這種溶質時，在油相中存在會比在水相中的多。可以看出，水和正己烷兩相中，糖與沙拉油的比例（即分配比）是很不一樣的。因此，如果想從等分試樣中只取出（分離）糖，可以只取出等分試樣的水相，讓水排掉，只得到糖。如果要提取出沙拉油，可以取出油相，進行同樣操作將其分離出來。