石蠟切片 | 合法醫療器材資訊網
石蠟切片不僅用於觀察正常細胞組織的形態結構,也是病理學和法醫學等學科用以...石蠟包埋、切片及染色等步驟以免細胞組織死亡,而能清晰辨認其形態結構。
石蠟切片(paraffin section) 組織學[1]常規製片技術中最為廣泛應用的方法。石蠟切片不僅用於觀察正常細胞組織[2]的形態結構,也是病理學[3]和法醫學等學科用以研究、觀察及判斷細胞組織的形態變化的主要方法,而且也已相當廣泛地用於其他許多學科領域的研究中。教學中,光鏡下觀察切片標本[4]多數是石蠟切片法製備的。活的細胞[5]或組織多為無色透明,各種組織間和細胞內各種結構之間均缺乏反差,在一般光鏡下不易清楚區別出;組織離開機體後很快就會死亡和產生組織腐敗,失去原有正常結構,因此,組織要經固定、石蠟[6]包埋、切片及染色[7]等步驟以免細胞組織死亡,而能清晰辨認其形態結構。
石蠟切片製作基本技術石蠟切片法包括取材、固定、洗滌和脫水[8]、透明、浸蠟、包埋、切片與粘片、脫蠟、染色、脫水、透明、封片等步驟。一般的組織從取材固定到封片製成玻片標本需要數日,但標本可以長期保存使用,為永久性顯微玻片標本。
1.取材 應根據要求選取材料來源及部位。例如植物細胞有絲分裂[9]多選取洋蔥根尖,細胞分裂快又便於切取;豬的肝小葉[10]邊界清晰明確;耳蝸[11]以豚鼠的內耳[12]易於定位和剝離。材料必須新鮮,擱置時間過久則產生蛋白質[13]分解變性,導致細胞自溶[14]及細菌[15]的滋生,而不能反映組織活體時的形態結構。
2.固定 用適當的化學[16]藥液——固定液浸漬[17]切成小塊的新鮮材料,迅速凝固或沉澱細胞和組織中的物質成分、終止細胞的一切代謝[18]過程、防止細胞自溶或組織變化,儘可能保持其活體時的結構。固定能使組織硬化,有利於切片的進行,而且也有媒浸作用,有利於組織著色。固定液的種類很多,其對組織的硬化收縮程度以及組織內蛋白質、脂肪、糖類等物質的作用各不相同。例如純酒精[19]可固定肝糖而能溶解脂肪,甲醛[20]能固定一般組織,但溶解肝糖和色素。固定液可分為單一固定液及混合固定液。前者有甲醛(蟻醛、福爾馬林)、酒精、醋酸[21]或冰醋酸[22]、升汞[23]、鋨酸[24](四氧化鋨[25])、重鉻酸鉀...
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