【競爭型免疫分析】小分子抗原半抗原測量Competitive ... | 合法醫療器材資訊網

【競爭型免疫分析套組】Competitive Inhibition ELISA-Cloud clone

競爭抑制ELISA法是指將特異性抗體吸附於固相載體，隨後加入待測抗原（標準品和样本）和一定量的生物素標記的抗原（檢測液A），使二者競爭與固相抗體結合，incubator後經洗滌去掉未結合物，然後加入HRP-Avidin，經過溫度和徹底Wash後加入底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，並在酸的作用下轉化成最終的黃色。待測標本濃度越高，標記抗原和抗體的結合就越受到抑制，顯色愈淺。顯色的深淺與酶量呈正相關，而與樣品中待測物質含量呈負相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。由於生物大分子可標記多個生物素，而生物素可以特異性結合酶標親和素，放大檢測信號，提高免疫分析敏感性。小分子抗原(Antigen)或半抗原因僅有單個抗原表位，缺乏雙抗體夾心法所需的基本條件。 – 具有2個或2個以上表位，所以對其常用競爭法進行測定其原理是將待檢抗原和酶標抗原與相應固相抗體競爭結合，標本中抗原越多，與固相抗體結合的酶標抗原越少，與底物反應生成的顏色越淺，因此根據顏色深淺可定量測定。原理圖如下：

當抗原(Antigen)片段太小，找不到相呼應的抗體對時，會利用一支抗體的競爭型方式做偵測。眾所周知，對於具有多個表位的抗原而言，雙夾心ELISA（Double Sandwich ELISA）可應用於目標抗原或抗體的定量檢測。而對於小分子抗原或半抗原，因缺 乏可作夾心法的兩個以上的結合位點，因此不能用雙抗體夾心法進行測定。此時， 可以採用競爭抑制法模式來檢測其中靶分子的含量。競爭抑制 ELISA 又叫Blocking ELISA，其主要原理是將標本中的抗原和一定量的酶標抗原競爭與固相抗體結合。 標本中抗原量含量愈多，結合在固相上的酶標抗原愈少，最後的顯色也愈淺，也就 是說，最終顯色的結果與待檢抗原或抗體的干擾程度成負相關。小分子激素、藥物 等 ELISA 測定多用此法。

通常意義上來說，小分子是指分子量很小的化合物，一般分子量...