第二講:流式細胞術原理&FSC與SSC | 合法醫療器材資訊網
2018年3月29日—前向散射光(Forwardscatter,FSC)和側向散射光(sidescatter,SSC)檢測器把散射光轉變成電信號。而熒光則被聚光器收集,不同顏色的熒光被 ...
我們在第一講:流式細胞術概述中介紹了流式細胞術是什麼,能夠檢測哪些樣本的哪些參數,三大系統以及數據的呈現形式;另外,我們前段時間為大家分享了常用流式細胞儀熒光參數。這一講,實驗小白為大家簡單介紹一下流式細胞術的基本原理以及FSC和SSC這兩個參數的用處。
流式細胞術原理在一定的壓力下,鞘液帶着細胞通過噴嘴中心進入到流式照射室,在流式照射室的分析點,激光照射到細胞發生散射和折射,發射出散射光(包括前向散射光和側向散射光);同時細胞所攜帶的熒光素被激光激發併發射出熒光。
前向散射光(Forward scatter, FSC)和側向散射光(side scatter, SSC)檢測器把散射光轉變成電信號。而熒光則被聚光器收集,不同顏色的熒光被雙色反光鏡轉向不同的光電倍增檢測器,把熒光信號也轉變成電信號。這些電信號再經過數據化處理後輸入電腦並儲存,即可對細胞進行分析或分選。
流式細胞術中的三大系統根據工作原理,流式可以劃分為液流系統、光學檢測系統和電子控制系統三大系統:
液流系統:流動室及液流驅動系統。
光學檢測系統:激光光源及光束形成系統;聚焦光源透鏡、各種濾光片;光電倍增管(PMT)收集不同波長熒光信號。
電子控制系統:熒光信號轉換為電信號,並將信號放大;電信號轉化為數字信號;流式軟件:收集,分析,數據和圖片的輸出。
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