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什麼是HPLC?...HPLC是高效能液相層析法(HighPerformanceLiquidChromatography)的簡稱。它是定性和定量分析中最為常用的分析方法之一。高效能液相層 ...
什麼是HPLC?HPLC是高效能液相層析法(High Performance Liquid Chromatography)的簡稱。它是定性和定量分析中最為常用的分析方法之一。
高效能液相層析法[1]可以對含有多種溶質成分的樣本進行快速且同步的定性和定量分析。高精密度的儀器使分析值具有很高的再現度。此外,注入HPLC的樣本量可以從幾微升(μL)的量級開始測量。HPLC系統的配置以及參數可以按照分析者的目的進行選擇,因此適用於很多不同的樣本。正因為這些特點,奠定了它的科技地位,支撐著全世界所有科學領域和產業基礎。
本文推薦給HPLC的新手 & 老手
新手 - 想從基礎學起的你 新手 - 初次使用HPLC的你 老手 - 想複習HPLC原理和基礎知識的你 HPLC的原理與特點在講解HPLC之前,我們先簡單回顧一下層析法。
層析法是由俄羅斯植物學家米哈爾・茨威特(Mikhail Tsvett)於1903年創立的一種物理分離物質的技術。基於兩相之間的分佈,層析法可將分離對象(分析種)有效率地分離。「兩相之間」聽起來可能會有點難懂的話,想像一下,水與油(如正己烷)兩種溶劑進行液-液分離操作。由於這兩種溶劑互不相溶,因此即使你試圖將它們混合,它們也會很快分離成兩相,亦即水相與油相。如果你加入另一種成分作為溶質,溶質將以何種相位存在?
例如,當加入糖這種易溶於水的溶質時,由於糖幾乎不溶於油相,所以更多存在水相之中。相反,當加入易溶於正己烷,如沙拉油這種溶質時,在油相中存在會比在水相中的多。可以看出,水和正己烷兩相中,糖與沙拉油的比例(即分配比)是很不一樣的。因此,如果想從等分試樣中只取出(分離)糖,可以只取出等分試樣的水相,讓水排掉,只得到糖。如果要提取出沙拉油,可以取出油相,進行同樣操作將其分離出來。
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