細胞毒性試驗 | 合法醫療器材資訊網

因WST-8formazan的產量取決於細胞內脫氫酶的活性，因而可直接反映存活細胞的數量(活細胞越多，顏色越深)。2.3LDHAssayKit.偵測破損細胞中釋放出的乳酸脫​ ...

細胞毒性介紹

細胞受有毒物質刺激時，會引起細胞整體型態改變、空泡化、剝離化、細胞溶解及細胞膜完整性發生改變，甚至引起細胞死亡等現象。

生物相容試驗為評估醫療器材或生醫材料間接或直接與人體接觸對於人體所產生之反應。細胞毒性試驗為生物相容試驗中唯一in-vitro bio-testing，該試驗時間短、設備要求不高。於產品開發階段時即可針對製程中半成品實施細胞毒性試驗。

細胞毒性試驗方法

1. 定性根據細胞形態予以評價

觀察細胞外觀是否成圓狀或細胞是否溶解以及細胞生長是否受到抑制。

2.  定量

2.1 MTT

MTT為黃色化合物，是一種接受氫離子的染料，可作用於活細胞粒線體中的呼吸鏈，在琥珀酸脫氫酶(SDH)和細胞色素C的作用下四氮唑環會開裂，生成紫色的甲䐶結晶，利用DMSO將甲䐶溶解出來之後，再利用測吸光度得知細胞還原MTT的能力，此吸光度代表了粒線體的活性，即活細胞數目，故此試驗可用作細胞存活率的指標。

2.2 CCK-8

使用高度水溶性tetrazolium salt-WST-8，可因活細胞內的脫氫酶(dehydrogenase)活性而被還原成可溶於培養基中的水溶性橘黃色產物(WST-8 formazan)。因WST-8 formazan的產量取決於細胞內脫氫酶的活性，因而可直接反映存活細胞的數量(活細胞越多，顏色越深)。

 2.3 LDH Assay Kit  

偵測破損細胞中釋放出的乳酸脫氫酶(lactate dehydrogenase，LDH)，LDH會催化乳酸(lactate)脫氫成丙酮酸(pyruvate)並伴隨著NAD+還原成NADH。接著，在電子傳遞者(electron mediator)的幫...