伊紅美藍培養基:原理,鑑定方法,配置方法,配方 | 合法醫療器材資訊網
基本介紹.中文名:伊紅美藍瓊脂培養基;外文名:eosin-methyleneblueagarmedium;EMBagarmedium;別名:曙紅 ...
原理 當大腸桿菌分解乳糖[1]產酸時細菌帶正電荷被染成紅色,再與美藍[2]結合形成紫黑色菌落[3],並帶有綠色金屬光澤。而產氣桿菌則形成呈棕色的大菌落。 在鹼性環境中不分解乳糖產酸的細菌不著色,伊紅[4]和美藍不能結合,故沙門氏菌等為無色或琥珀色半透明菌落。金葡菌在此培養基上不生長。 常用的伊紅美藍乳糖培養基,可用來鑑別飲用水和乳製品中是否存在大腸桿菌等細菌。如果有大腸桿菌,因其強烈分解乳糖而產生大量的混合酸[5],菌體帶H+,故菌落被染成深紫色,從菌落表面的反射光[6]中還可以看到金屬光澤。 鑑定方法步驟如下:
①製作伊紅美藍培養基,趁熱注入培養皿[7]中,凝成平板,待用。②用滅過菌的錐形瓶盛取河水或溝水,按1:10稀釋。
④將劃線後的培養皿倒置37℃溫箱中培養18~24小時。培養基中會出現大腸桿菌菌落[8],菌落中心呈暗藍黑色,發金屬光澤。 ⑤將菌落接種於斜面培養基[9]上(由營養瓊脂培養基製成)。 配置方法 配方磷酸氫二鉀 2g
瓊脂 20~30g
儲備培養基 先將瓊脂加至900ml蒸餾水,加熱溶解,然後加入磷酸氫二鉀及蛋白腖,混勻使之溶解,再以蒸餾水補足至1000ml,調整PH為7.2~7.4。趁熱用脫脂棉或絨布過濾,再加入乳糖[10],混勻後定量分裝於燒瓶內,置高壓蒸汽滅菌器內以115℃滅菌20min,貯存於冷暗處備用。 製法 將蛋白腖、磷酸鹽和瓊脂溶解於蒸餾水中,校正PH,分裝於燒瓶內,121℃高壓滅菌15min備用。臨用時加入乳糖[11]並加熱溶化瓊脂,冷至50~55℃,加入伊紅[12]和美藍[13]溶液,搖勻,傾注平板。 References 乳糖 (www.newton.com.tw) 美藍 (www.newton.com...EMB琼脂培养基 | 合法醫療器材資訊網
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