Immunofluorescence Staining | 合法醫療器材資訊網
Thefirststepofanimmunofluorescencestainingprotocolistofixatethesample.Thisisusuallydonebyincubatingthesamplefor10minutesatroomtemperature ...
Before starting an immunostaining, a literature research should be done to determine the expression levels and intracellular localization of the protein of interest in the chosen model system. Some proteins have a very low expression, either generally, or in certain cell lines. In this case, the expression might have to be induced by external stimuli or overexpression techniques.
Further, the optimal cell density has to be determined. In general, a confluence of 70%–80% is recommended for immunocytochemistry.
In addition, the ideal cell culture vessel geometry and substrate/coating must be determined, and needs to be compatible with the chosen microscopy method. During the whole experiment, it is crucial that the cells never dry out, which should be considered when choosing the appropriate cell culture vessel geometry.
Finally, the number of samples to be stained and analyz...
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