什麼是RNAscope® in situ hybridization (ISH)技術 | 合法醫療器材資訊網
2018年11月19日—什麼是RNAscope®insituhybridization(ISH)技術...測靈敏度並且降低來自非特異性雜交的背景干擾。RNAscope®ISH的操作原理及步驟如下:.
生物標記包含DNA、RNA以及蛋白質,可用於分析細胞的功能、臨床疾病診斷並且幫助醫生選擇治療方式。其中,用以評估個體動態基因表達的改變,RNA為最理想的指標[1]。
在檢測技術日新月異,過去原位RNA檢測技術(ISH和FISH)已發展多年,但這些技術在特殊檢體上還是有許多的局限存在。例如它們缺乏可靠性和靈敏度,用以準確地檢測大多數人類基因的表達。此外,微陣列(Microarray)與PCR技術是常用於分子診斷分析的標準分子檢測方法,但是在這些技術最大的問題就在於只能偵測含量多寡,但無法偵測整體細胞或組織的臨床信息以及表達分佈情形。
為解決這些問題,ACD (Advanced Cell Diagnostics Inc., Hayward, CA)開發了RNAscope® in situ hybridization (ISH),透過獨特探針和放大信號的新型核酸原位雜交染色技術,可以取代傳統ISH/FISH RNA原位檢測 [2],此技術幾乎能夠設計出所有物種的目標探針並且提供性能的保證,而其探針製造只需要兩週以內的時間,比起全新抗體製造,所需要的時間少了很多,另外,透過雙Z探針設計,RNAscope® ISH能夠放大訊號提高偵測靈敏度並且降低來自非特異性雜交的背景干擾[1]。
RNAscope® ISH的操作原理及步驟如下[2]:
1、透化
利用RNAscope® ISH試劑盒中的kit預先處理載玻片上已固定好的細胞或組織檢體,使其暴露出目標RNA,以利探針辨識。
2、探針雜交
RNAscope® ISH設計雙Z探針目標探針,能與目標RNA做雜交反應。
3、信號放大...
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