液相層析 | 合法醫療器材資訊網
2015年6月4日—液相層析利用動相(mobilephase)和靜相(stationaryphase)的交互作用,當混合物進入系統內時,不同成分的特性將決定物質在層析管柱內流動的 ...
液相層析(Liquid Chromatography) 國立臺灣師範大學化學系碩士班二年級 翁于婷
層析法是常見且普遍,可將複雜的混合物分離純化的方法。以層析系統的動相分類,主要有氣相層析與液相層析等等1,而液相層析法適用於純化大部分的化合物。
液相層析利用動相 (mobile phase) 和靜相 (stationary phase) 的交互作用,當混合物進入系統內時,不同成分的特性將決定物質在層析管柱內流動的快慢,再利用各成分移動速率之不同來分離2。液相層析儀最主要就是「動相式液體」,所以在液相層析法裡又有:液固層析法 (LSC) 和液液層析法 (LLC)。
液固層析法 (LSC) 或名為吸附層析法,是靜相為細粒固體之表面,溶質與沖提劑競爭固體表面的吸附面積,最適合拿來分離低極性的有機物,也就是最常被使用的高效率液相層析 (HPLC, High-performance liquid chromatography) 的原理3。在這兩相中,通常極性較大的液體會固定吸附在靜相的惰性載體上,而極性較小的液體溶劑則會被當作移動相、極性小的物質先流出,此時稱為「正相層析」(normal phase adsorption)。反之靜相吸附的液體極性小甚至是非極性液體,而移動相為極性液體、極性大的物質先流出,則稱為「逆向層析」(reverse phase adsorption)。
動相的選擇對液固層析法極為重要,此沖提法最常使用梯度沖提法,先利用沖提強度較低的溶劑將容易沖提的物質分離,然後逐漸增加沖提強度高的溶劑量,以致於可將吸附較緊密的物質從管柱中除去。此層析法最適合分子量小於 2000 的非極性化合物,並能溶解在低極性溶劑中,區別異構混合物4。
液液層析法 (LLC) 或名分配層析法,將和移動相不互溶的另一種液體附著於非活性固態顆粒的表面上,形成一層薄膜,因樣品中每個不同的成分對兩種液相有不同的分配率 (partition ...
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