免疫膠體金技術 | 合法醫療器材資訊網
免疫膠體金技術(Immunecolloidalgoldtechnique)是以膠體金作為示蹤標誌物套用於抗原抗體的一種新型的免疫標記技術,英文縮寫為:GICT。膠體金是由氯金 ...
簡介免疫膠體金技術(Immune colloidal gold technique) 是以膠體金作為示蹤標誌物套用於抗原抗體的一種新型的免疫標記技術,英文縮寫為:GICT。膠體金是由氯金酸[1](HAuCl4)在還原劑[2]如白磷[3]、抗壞血酸、枸櫞酸鈉、鞣酸等作用下,聚合成為特定大小的金顆粒,並由於靜電作用成為一種穩定的膠體狀態,稱為膠體金。膠體金在弱鹼環境下帶負電荷,可與蛋白質分子的正電荷[4]基團[5]形成牢固的結合,由於這種結合是靜電結合,所以不影響蛋白質的生物特性。 膠體金除了與蛋白質結合以外,還可以與許多其它生物大分子結合,如SPA、PHA、ConA等。根據膠體金的一些物理性狀,如高電子密度、顆粒大小、形狀及顏色反應,加上結合物的免疫和生物學特性,因而使膠體金廣泛地套用於免疫學、組織學[6]、病理學和細胞生物學等領域。
使用優點(1)使用方便快速,便於基層使用和現場使用,所有反應能在15分鐘內完成;
(2)成本低,不需要特殊的儀器設備;
(3)套用範圍廣,可適應多種檢測條件;
(4)可以進行多項檢測,若陽性樣本比較難獲得,多項檢測可以節省樣品,降低成本;
(5)標記物穩定,標記樣品在4℃貯存兩年年以上,無信號衰減現象;
(6)膠體金本身為紅色,不需要加入發色試劑,省卻了酶標的致癌性底物及終止液的步驟,對人體無毒害。
顆粒製備根據不同的還原劑可以製備大小不同的膠體金顆粒。常用來製備膠體金顆粒的方法如下。
1.枸櫞酸三鈉還原法
(1)10nm膠體金粒的製備:取0.01%HAuCl4水溶液100ml,加入1%枸櫞酸三鈉水溶液3ml,加熱煮沸30min,冷卻至4℃,溶液呈紅色。
(2)15nm膠體金顆粒的製備:取0.01%HAuCl4水溶液100ml,加入1%枸櫞酸三鈉水溶液2ml,加熱煮沸15min~30min,直至顏色變...
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