十二烷基硫酸鈉聚丙烯醯胺凝膠電泳 | 合法醫療器材資訊網
十二烷基硫酸鈉聚丙烯醯胺凝膠電泳(英語:sodiumdodecylsulfatepolyacrylamidegelelectrophoresis,簡稱SDS-PAGE)是膠體電泳的一種,常用於生物 ...
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紅血球膜的蛋白質根據其分子量通過SDS-PAGE分離十二烷基硫酸鈉聚丙烯醯胺凝膠電泳(英語:sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,簡稱SDS-PAGE)又稱 SDS聚丙烯醯胺凝膠電泳、萊氏凝膠電泳,是膠體電泳的一種,常用於生物化學、鑑識科學、遺傳學和分子生物學等領域的分析技術,此項技術的原理,是利用檢體中蛋白質分子量大小的不同,使其在電泳膠中分離。是最常用的蛋白質分析技術之一。[1]為萊氏(Ulrich K. Laemmli)所研發。
Bio-Rad公司的SDS-PAGE裝置將蛋白質溶液與SDS(十二烷基硫酸鈉)混合,SDS為界面活性劑會破壞蛋白質的二級結構使其變性,並包覆變性蛋白質,使其帶有一致的負電荷(大約每兩個胺基酸一個SDS)和一致的形狀(長條形)。如果沒有SDS使其負電荷一致,可能會使有相近分子量的蛋白質,分布於不同的位置,此種電泳法為原態膠體電泳(Native-PAGE)。進行電泳時,分子量較小的較容易落下,相反的分子量較大的則卡在起點附近。雖然較大的電壓可以縮短實驗的時間,卻會得到較模糊的結果,因此實驗可能長達數個小時。
材料與功能[編輯]丙烯醯胺是聚丙烯醯胺凝膠的基本成份,丙烯醯胺透過橋架分子聚合。
使用直立電泳組合時,由上(負極)至下(正極)的主要組成分別為緩衝液(Tris-Glycine,pH 8.3)→樣本溶液(pH 6.8)→堆積層(Tris-HCl,pH 6.8)→分離層(Tris-HCl,pH 8.8)→緩衝液(Tris-Glycine,pH 8.3)。
樣本在堆疊層電泳的過程中,會被壓成一個薄層,再以相同的起始...
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