如何用ImageJ對條帶進行定量分析？ | 合法醫療器材資訊網

2018年9月21日—其實，它被廣泛用於膠圖條帶的定量分析，如下圖這篇文章就是用ImageJ分析western-blot條帶灰度值（Banddensity）進行相對定量。（Nature，2010）.

ImgaeJ是一款比較常用的科研圖片分析軟件，在之前已介紹過用它來進行細胞計數、不同顏色通道的熒光照片的融合和不規則區域面積的測定等（參見 拓展閱讀部分）。

其實，它被廣泛用於膠圖條帶的定量分析，如下圖這篇文章就是用Image J分析western-blot條帶灰度值（Band density）進行相對定量。

（Nature，2010）

下面就介紹下如何用ImageJ 進行條帶的灰度分析。

首先，通過FileOpen打開要分析的膠圖，如下圖。

接下來通過 ImageType8-bit（如下圖）將圖片轉爲爲8位的灰度圖，即從黑到白有256（0~255）種灰色的黑白圖片。

接下來，將膠圖的灰色背景去掉，方法見下圖。

然後用矩形選框工具框選一個條帶或泳道（先選最寬的），然後通過Analyze /gels / select first lane（快捷鍵ctrl+1）爲泳道編號，移動編好的選區複製出新選區，接着通過 Analyze / gels / select secondlane（快捷鍵ctrl+2）爲其他泳道編號，方法見下圖。

完成之後，通過analyze/ gels / plot lanes（快捷鍵 ctrl+3）（如下圖）繪製條帶的峯圖。

接下來只需用魔棒工具（Wand tool）點擊每個峯的中間區域即可逐一完成對峯面積的計算，計算的結果在Result 窗口顯示，可通過File 導出爲xls文件。最後用目標蛋白的面積值除以內參蛋白的面積值，即可得到相對錶達量，進而可繪製柱狀圖。

如過把...